可溶性蛋白免疫:
针对游离配体、单跨膜蛋白胞外区(ECD)等可溶性抗原开展免疫,抗原空间构象稳定、制备质控简便,可高效刺激动物免疫系统,诱导机体产生靶向特异性免疫应答,最终筛选获得 IgG 全分子抗体或结构更小、组织穿透性更优的纳米抗体,是科研工具抗、诊断抗体开发的通用方案。
膜蛋白免疫:
膜蛋白包含单次跨膜螺旋、多次跨膜螺旋、β- 桶孔蛋白、单栖两亲螺旋、脂蛋白、外周膜蛋白等多种复杂结构,天然镶嵌于磷脂双分子层,疏水跨膜区极易失活,常规重组蛋白制备难以完整保留天然构象。纳博生命针对各类整合膜蛋白、外周膜蛋白、脂蛋白建立专属免疫工艺,可最大程度维持膜蛋白完整天然三维结构,完整呈现胞外、跨膜结构域真实抗原表位,有效规避抗原变性导致的无效免疫、低特异性克隆富集问题,助力筛选靶向膜蛋白靶点的功能性纳米抗体,适配 GPCR、离子通道、病毒膜蛋白等难成药靶点抗体研发。
根据靶点分析选择蛋白抗原进行免疫,免疫流程如下:
|
序号 |
时间 |
免疫操作流程 |
|
1 |
Day 0 |
免疫前采血收集阴性血清。 |
|
2 |
Day 1 |
首免:0.5 mg 蛋白免疫原+完全弗氏佐剂;分10个位点皮下注射。 |
|
3 |
Day 14 |
2免:0.25 mg 蛋白免疫原+不完全弗氏佐剂;分5个位点皮下注射。 |
|
4 |
Day 21 |
收集1mL全血,分离血清,用多肽做ELISA滴度检测。 |
|
5 |
Day 28 |
3免:0.25 mg 蛋白免疫原+不完全弗氏佐剂;分5个位点皮下注射。 |
|
6 |
Day 35 |
收集1mL全血,分离血清,用多肽做ELISA滴度检测。 |
|
7 |
Day42 |
4免:0.25 mg 蛋白免疫原+不完全弗氏佐剂;分5个位点皮下注射。 |
|
8 |
Day 49 |
采集10 mL全血,分离血清后开展蛋白ELISA效价检测。根据效价检测结果执行以下操作:
|
