小分子免疫

小分子免疫是制备小分子特异性抗体的主流技术。分子量 1000 Da 以下的小分子仅为半抗原,无法单独诱导免疫应答,需通过碳链连接臂与 KLH、BSA 等大分子载体蛋白共价偶联形成完全抗原,借助载体的 T 细胞表位激活机体体液免疫。该体系可针对药物、毒素、农残、内源激素等各类小分子产出高特异性抗体,广泛应用于体外快速诊断、免疫富集、药代分析与细胞分子示踪,是小分子靶点检测与生物分析不可或缺的核心技术。

小分子免疫流程:

序号 时间 免疫操作流程
1 Day 0 免疫前采血收集阴性血清。
2 Day 1
首免:0.5 mg 小分子免疫原+完全弗氏佐剂;分10个位点肌肉注射。
3 Day 14
2免:0.25 mg 小分子免疫原+不完全弗氏佐剂;分5个位点肌肉注射。
4 Day 21
收集1mL全血,分离血清,用多肽做ELISA滴度检测。
5 Day 28
3免:0.25 mg 小分子免疫原+不完全弗氏佐剂;分5个位点肌肉注射。
6 Day 35
收集1mL全血,分离血清,用多肽做ELISA滴度检测。
7 Day 42
4免:0.25 mg 小分子免疫原+不完全弗氏佐剂;分5个位点肌肉注射。
8 Day 49

采集10 mL全血,分离血清后开展小分子ELISA效价检测。根据效价检测结果执行以下操作:

  • 采集50 mL全血,分离血清并再次进行多肽ELISA效价检测;
  • 取剩余全血分离外周血单个核细胞(PBMC),取2.0×10⁷个细胞加入1 mL TRIzol试剂裂解,按每管1 mL进行分装冻存。

结果分析:


交付内容: